高效液相色谱法基础是经典的液相色谱，是以高压下的液体为流动相的色谱过程。经典的液相色谱有柱层析、薄层层析或纸层析。世界上约有80%的有机化合物可以用高效液相色谱法HPLC来分析测定。高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代后期发展起来的一种分析方法。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。下面微谱介绍关于高效液相色谱法测定，高效液相色谱分析法知识。
一、高效液相色谱法测定
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送(***高输送压力可达29.4MPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
特点：1.高压2.高速3.高效4.高灵敏度5.适应范围宽。
二、高效液相色谱分析法
1、传统液相色谱:
所用的固定相为大于100um的吸附剂（硅胶、氧化铝等）。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大，传质扩散慢，因而柱效低，分离能力差，只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用的固定相粒度小（5um-10um）、传质快、柱效高。
2、高效液相色谱分析
由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离（极性范围比较宽）还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而HPLC改变的是流动相极性，使样品各组分在***佳条件下得以分离。
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