内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖和蛋白的复合物，当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。内毒素大量进入血液就会引起发热反应—“热原反应”。内毒素与多种感染疾病密切相关。因此，快速检测血液及脏器内毒素含量可以为临床相关疾病的诊断预后提供参考。下面微谱为您介绍关于内毒素检测方法步骤，内毒素检测标准和正常值相关知识。
一、内毒素检测方法步骤
1.凝胶法：通过鲎试剂（鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等）与内毒素发生凝集反应产生凝固蛋白（凝胶）的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。凝胶法是通过观察有无凝胶形成作为反应的终点。此法操作比较简单，经济，不需要专用测定设备，可以进行定性或半定量测定。
2.动态浊度法；浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。内毒素与鲎试剂中的凝固酶原激活呈凝固酶，凝固酶可使凝固蛋白原变成凝固蛋白（即产生凝胶），使液体的浊度发生变化，通过动态观察浊度变化速率检测。
3.终点显色法:通过由于细菌内毒素激活鲎试剂（鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等）C因子，引起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质（含N-α-苯甲酰-DL-精氨酰-4-硝基苯胺盐酸盐），使其分解为多肽和黄色的对硝基苯胺（pNA，λmax=405nm）。同时，对硝基苯胺（pNA）也可用偶氮化试剂染成玫瑰红色（λmax=545nm），避免了供试品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰。根据产物颜色判断内毒素浓度，又称为比色法。
4.动态显色法:内毒素可激活鲎试剂引起一系列酶促反应，产生黄色的对硝基苯胺（pNA，λmax=405nm），在一定时间内，动态观察对硝基苯胺（pNA）的生成量，与细菌内毒素浓度成正相关。但此方法需要带温育系统的动态光度测定仪器及配套软件。
5.其他检测方法：还有一些直接测定内毒素定量的方法如酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫学方法（如火箭免疫电泳试验法、L-聚赖氨酸法、双抗体夹心法、荧光偏振法等）等。
二、内毒素检测标准和正常值:
1.内毒素检测标准
JJF1529-2015细菌内毒素分析仪校准规范
JB/T20184-2017细菌内毒素测定仪
ASTME2144-2011工作场所环境中金属加工液体气溶胶中内毒素的个人取样和分析的标准实施规程
YY/T0618-2017医疗器械细菌内毒素试验方法常规监控与跳批检验
YY/T1295-2015医疗器械生物学评价纳米材料：细菌内毒素试验
BSEN13098-2001(R2010)工作场所空气.气载微生物和内毒素测量导则
ISO29701-2010纳米技术体外系统用纳米材料样品的内毒素试验鲎变形细胞溶解产物(LAL)试验
ASTME2657-2011测定易混合水的金属加工液中内毒素浓度的试验方法
ASTMD7102-2010消过毒的医用手套上内毒素的测定指南
2.正常人血中内毒素浓度为：＜0.1EU/ml。
以上就是小编为大家带来的关于内毒素检测方法步骤，内毒素检测标准和正常值的相关内容介绍，希望对大家能够有所帮助，如果您想要了解更多资讯请联系微谱客服！
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