液相色谱是一类分离与分析技术,它的特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式。其中经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,固定相的粒度不能太小,高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,采用了气相色谱的理论,流动相改成高压输送,色谱柱是用小粒径的填料填充而成的,从而使柱效大大高于经典液相色谱;同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。下面微谱为大家介绍下关于液相色谱检测原理,液相色谱检测方法方面知识。
一、液相色谱检测原理
1、高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。
2、高效液相色谱法的特点:
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,所以必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、较经典液体色谱法速度快得多。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到***佳分离效果。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是大分子、高沸点、热稳定性差化合物的分离分析。
二、液相色谱检测方法
基本方法是将一定极性的单一溶剂或者是不同比例的混合溶液作为流动相,然后用高压输液泵将流动相注入装有填充剂的色谱柱,注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后,各成分先后进入检测器,并用记录仪或数据处理装置记录色谱图或进行数据处理,得到测定结果。由于应用各种性质的微粒填料和加压的液体流动相,本法具有分离性能高,分析速度快的特点。
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